Đồ án tốt nghiệp - Sàng lọc hoạt tính ức chế α-glucosidase của các dẫn xuất 4 NCCCVĐHỨCCHCCHTTNN

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP. HỒ CHÍ MINH


KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

SÀNG LỌC HOẠT TÍNH ỨC CHẾ
α-GLUCOSIDASE CỦA CÁC DẪN XUẤT
4-FLUOROCHALCONOID, NGHIÊN CỨU
CƠ CHẾ VÀ ĐỘNG HỌC ỨC CHẾ CỦA
HỢP CHẤT CÓ HOẠT TÍNH TIỀM NĂNG NHẤT

SVTH: Hoàng Thảo Nguyên
MSSV: 20128138
GVHD: PGS.TS. Hoàng Minh Hảo

Tp. Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2024

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP. HỒ CHÍ MINH


KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

SÀNG LỌC HOẠT TÍNH ỨC CHẾ
α-GLUCOSIDASE CỦA CÁC DẪN XUẤT
4-FLUOROCHALCONOID, NGHIÊN CỨU
CƠ CHẾ VÀ ĐỘNG HỌC ỨC CHẾ CỦA
HỢP CHẤT CÓ HOẠT TÍNH TIỀM NĂNG NHẤT

SVTH: Hoàng Thảo Nguyên
MSSV: 20128138
GVHD: PGS.TS. Hoàng Minh Hảo

Tp. Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2024

TÓM TẮT
Bệnh đái tháo đường tuýp 2 là một trong những bệnh mãn tính phổ biến và đang gia
tăng nhanh chóng trên toàn cầu. Mặc dù các chất ức chế α-glucosidase hiện tại như
acarbose, miglitol, voglibose đã được sử dụng trong điều trị nhưng chúng thường gây ra
các tác dụng phụ không mong muốn như đau bụng, đầy hơi và khó tiêu. Để khắc phục
vấn đề này, đề tài “Sàng lọc hoạt tính ức chế α-glucosidase của các dẫn xuất
4-fluorochalconoid, nghiên cứu cơ chế và động học ức chế của hợp chất có hoạt
tính tiềm năng nhất.” đã được thực hiện. Năm dẫn xuất 4-fluorochalconoid bao gồm
NU05, NU06, PT10, PT11 và PT12 do hai anh chị sinh viên Phạm Thành Trung và
Phạm Thị Ngọc Uyên K19 Trường Đại học Sư phạm Kỹ thuật Thành phố Hồ Chí Minh
tổng hợp, được sàng lọc in vitro hoạt tính ức chế α-glucosidase và PT12 được xác định
là có hoạt tính ức chế α-glucosidase cao nhất (IC50 = 48,94 ± 0,19 μM), vượt trội hơn
so với acarbose (IC50 = 69,58 ± 2,04 μM) nên PT12 được chọn làm hoạt chất để nghiên
cứu cơ chế và động học ức chế α-glucosidase. Kết quả nghiên cứu động học enzyme qua
việc xây dựng đồ thị Lineweaver-Burk và đồ thị Dixon cho thấy rằng PT12 ức chế
α-glucosidase theo cơ chế ức chế cạnh tranh (competitive inhibition) với hằng số ức chế
Ki nhỏ cho thấy PT12 ức chế α-glucosidase mạnh Ki = (34,74 ± 0,28) × 10-6 (M). Ngoài
ra, để hiểu sâu hơn về cách thức tương tác của PT12 với α-glucosidase, nghiên cứu đã
tiến hành phân tích động học dập tắt huỳnh quang. Phân tích phổ phát huỳnh quang cho
thấy PT12 dập tắt sự phát huỳnh quang của α-glucosidase thông qua cơ chế dập tắt động
và tĩnh, trong đó cơ chế dập tắt tĩnh chiếm ưu thế với hằng số dập tắt lưỡng phân tử
kq = (3,38 ± 0,26) × 1012
...

...


1,3761

1,3928

1,5283

Phụ lục 24: Số liệu trung bình và sai số SD đồ thị Lineweaver-Burk PT12

????
[????????????????]

Nồng độ PT12 (μM)

(mM-1)
0

2

6

20

3,725 ± 0,026

3,883 ± 0,019

4,031 ± 0,032

10

2,127 ± 0,011

2,161 ± 0,027

2,356 ± 0,010

6,67

1,585 ± 0,021

1,6251 ± 0,0051

1,7321 ± 0,0098

5

1,3789 ± 0,0042

1,3966 ± 0,0042

1,524 ± 0,010

59

Phụ lục 25: Số liệu lần 1 đồ thị Dixon của PT12
Nồng độ pNPG (mM)

[PT12]
(μM)

0,05

0,10

0,15

0,20

0

3,7547

2,1186

1,5848

1,3768

2

3,8911

2,1142

1,6251

1,3966

6

3,9947

2,3511

1,7351

1,5314

Phụ lục 26: Số liệu lần 2 đồ thị Dixon của PT12
Nồng độ pNPG (mM)

[PT12]
(μM)

0,05

0,10

0,15

0,20

0

3,7175

2,1231

1,6

1,3838

2

3,8961

2,1614

1,61551

1,3863

6

4,0431

2,3493

1,72117

1,5121

Phụ lục 27: Số liệu lần 3 đồ thị Dixon của PT12
Nồng độ pNPG (mM)

[PT12]
(μM)

0,05

0,10

0,15

0,20

0

3,7037

2,1398

1,5593

1,37615

2

3,861

2,1614

1,6234

1,39276

6

4,0541

2,3678

1,7401

1,52827

60

Phụ lục 28: Số liệu trung bình và sai số SD đồ thị Dixon của PT12
[PT12]
(μM)

Nồng độ pNPG (mM)
0,05

0,10

0,15

0,20

0

3,725 ± 0,026

2,127 ± 0,011

1,585 ± 0,021

1,3789 ± 0,0042

2

3,883 ± 0,019

2,161 ± 0,027

1,6251 ± 0,0051

1,3966 ± 0,0042

6

4,031 ± 0,032

2,356 ± 0,010

1,7321 ± 0,0098

1,524 ± 0,010

Phụ lục 29: Giá trị ???????????????? , Ki của acarbose và PT12
Mẫu thử

Acarbose

PT12

Đại lượng

???????????????? (OD/min)

Ki × 10-6 (M)

???????????????? (OD/min)

Ki × 10-6 (M)

Lần 1

8,06

656,27

1,7754

34,555

Lần 2

7,94

652,30

1,7621

34,6

Lần 3

8,33

657,26

1,8165

35,056

Trung bình

8,11

655,28

1,7846

34,737

SD

0,20

2,62

0,0283

0,2772

Phụ lục 30: Giá trị ???????? theo từng nồng độ của acarbose
Km×10-4 (M)

[Acarbose] (μM)
0

50

200

300

Lần 1

7,2464

8,0000

9,8039

11,1111

Lần 2

7,0423

7,6336

9,6154

10,9890

Lần 3

7,5188

8,1301

10,0746

10,7527

Trung bình

7,27

7,92

9,83

10,95

SD

0,24

0,26

0,23

0,18

61

Phụ lục 31: Giá trị ???????? theo từng nồng độ của PT12
[PT12] (μM)

0

2

6

Lần 1

2,8162

2,9289

3,1095

Lần 2

2,7578

2,9348

2,9949

Lần 3

2,8658

3,0447

3,2260

Trung bình

2,813

2,969

3,110

SD

0,054

0,065

0,012

Phụ lục 32: Số liệu đồ phương trình Stern–Volmer
[PT12] (µM)

F0/F

SD

0

1,000

0,028

30

1,828

0,045

42,75

2,310

0,048

65,25

3,333

0,081

75

3,885

0,100

Phụ lục 33: Số liệu đồ thị phương trình (17)
log[PT12]

log(F0/F-1)

SD

1,477

-0,082

0,024

1,631

0,117

0,016

1,815

0,368

0,015

1,875

0,460

0,015

62