tmu

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP. HỒ CHÍ MINH


KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

SÀNG LỌC HOẠT TÍNH ỨC CHẾ

-GLUCOSIDASE CỦA CÁC
DẪN XUẤT 3-FLUOROCHALCONOID,
NGHIÊN CỨU CƠ CHẾ VÀ
ĐỘNG HỌC ỨC CHẾ CỦA HỢP CHẤT
CÓ HOẠT TÍNH TIỀM NĂNG NHẤT
SVTH: Đỗ Khánh Đạt
MSSV: 20128037
GVHD: PGS.TS. Hoàng Minh Hảo

Tp. Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2024
1

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP. HỒ CHÍ MINH


KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

SÀNG LỌC HOẠT TÍNH ỨC CHẾ

-GLUCOSIDASE CỦA CÁC
DẪN XUẤT 3-FLUOROCHALCONOID,
NGHIÊN CỨU CƠ CHẾ VÀ
ĐỘNG HỌC ỨC CHẾ CỦA HỢP CHẤT
CÓ HOẠT TÍNH TIỀM NĂNG NHẤT
SVTH: Đỗ Khánh Đạt
MSSV: 20128037
GVHD: PGS.TS. Hoàng Minh Hảo

Tp. Hồ Chí Minh, tháng
2 08 năm 2024

TÓM TẮT
Đái tháo đường là một căn bệnh mạn tính với nhiều biến chứng nguy hiểm, biểu hiện
đặc trưng của bệnh là hiện tượng tăng đường huyết và rối loạn chuyển hóa carbohydrate.
Nhằm tìm kiếm và bổ sung các dẫn xuất chalconoid tiềm năng, phong phú với khả năng
làm hạ đường huyết nên đề tài “Sàng lọc hoạt tính ức chế -glucosidase của các dẫn
xuất 3-fluorochalconoid, nghiên cứu cơ chế và động học ức chế của hợp chất có
hoạt tính tiềm năng nhất” được thực hiện nhằm mục tiêu sàng lọc các dẫn xuất
3-fluorochalconoid tiềm năng, làm tiền đề phát triển thuốc hạ đường huyết. Kết quả
khảo sát sàng lọc trên mô hình in vitro cho thấy, các dẫn xuất 3-fluorochalconoid đều
có hoạt tính ức chế -glucosidase. Trong đó, dẫn xuất NU08 có hoạt tính mạnh nhất với
IC50 = 6,84 M nên được chọn làm hoạt chất để nghiên cứu cơ chế và động học ức chế

-glucosidase. Phân tích phổ phát huỳnh quang cho thấy NU08 dập tắt huỳnh quang của
-glucosidase thông qua hai cơ chế: Dập tắt huỳnh quang động và dập tắt huỳnh quang
tĩnh trong đó dập tắt huỳnh quang tĩnh chiếm ưu thế, nghĩa là ưu tiên tạo phức ở trạng
thái nền. Kết quả thực nghiệm thu được hằng số dập tắt huỳnh quang lưỡng phân tử
kq = 1,91  1012 M-1s-1, hằng số kết hợp Ka = 2,84  104 M-1 và số lượng khoang gắn kết
trên mỗi phân tử enzyme là n = 0,95. Để nghiên cứu cơ chế tương tác giữa NU08 và

-glucosidase, phổ phát huỳnh quang của phức chất -glucosidase với 8-anilino-1naphthalenesulfonic acid (ANS) đã được khảo sát khi không có và có NU08 ở các nồng
độ khác nhau. ANS kết hợp với enzyme thông qua tương tác kỵ nước để hình thành phức
chất phát huỳnh quang [-glucosidase-ANS]. Kết quả cho thấy cường độ phát huỳnh
quang của phức chấ
...

...
Số liệu đo trung bình và giá trị SD đồ thị Lineweaver–Burk của NU08
1/[pNPG]
NU08 0 μM
NU08 3 μM
NU08 6 μM
NU08 9 μM
(mM-1)
20,00
7,773  0,081
10,896  0,099
12,329  0,077
16,636  0,053
10,00
4,422  0,097
6,69  0,25
7,335  0,064
9,978  0,019
6,67
3,225  0,095
5,3286  0,0095
5,634  0,037
7,420  0,028
5,00
2,771  0,082
4,375  0,026
4,634  0,078
5,894  0,012

Phụ lục 31: Số liệu đo lần 1 đồ thị Dixon của NU08
[NU08]
pNPG
pNPG
pNPG
pNPG
(μM)
(0,05 mM) (0,10 mM) (0,15 mM) (0,20 mM)
0,00
7,85
4,49
3,31
2,84
3,00
10,91
6,86
5,33
4,40
6,00
12,40
7,39
5,59
4,66
9,00
16,67
10,00
7,39
5,88

Phụ lục 32: Số liệu đo lần 2 đồ thị Dixon của NU08
[NU08]
pNPG
pNPG
pNPG
pNPG
(μM)
(0,05 mM) (0,10 mM) (0,15 mM) (0,20 mM)
0,00
7,77
4,46
3,25
2,80
3,00
10,99
6,80
5,34
4,38
6,00
12,35
7,35
5,66
4,69
9,00
16,67
9,97
7,44
5,91

67

Phụ lục 33: Số liệu đo lần 3 đồ thị Dixon của NU08
[NU08]
pNPG
pNPG
pNPG
pNPG
(μM)
(0,05 mM) (0,10 mM) (0,15 mM) (0,20 mM)
0,00
7,69
4,31
3,12
2,68
3,00
10,79
6,55
5,32
4,35
6,00
12,24
7,26
5,65
4,55
9,00
16,67
9,97
7,43
5,89

Phụ lục 34: Số liệu đo trung bình và giá trị SD đồ thị Dixon của NU08
[NU08]
pNPG
pNPG
pNPG
pNPG
(μM)
(0,05 mM)
(0,10 mM)
(0,15 mM)
(0,20 mM)
0,00
7,773  0,081
4,422  0,097
3,225  0,095
2,771  0,082
3,00
10,896  0,099
6,69  0,25
5,3286  0,0095
4,375  0,026
6,00
12,329  0,077
7,335  0,064
5,634  0,037
4,634  0,078
9,00
16,636  0,053
9,978  0,019
7,420  0,028
5,894  0,012

Phụ lục 35: Số liệu của đồ thị phương trình Stern–Volmer
[NU08] (μM)
0
6
9
11
13
F0/F
1,0000
1,127
1,183
1,220
1,251
SD
0.0088
0,012
0,013
0,015
0,017

Phụ lục 36: Số liệu của đồ thị phương trình (11)
log[NU08]
0,778
0,933
1,038
1,150
log(F0-F/F)
-0,903
-0,760
-0,650
-0,587
SD
0,030
0,019
0,018
0,016

68

Phần trăm ức chế enzyme (%)

100
80

y = 0,1921x - 19,237
R² = 0,9588

60
40
20
0
0

100

-20

200

300

400

500

600

[NA06] (M)

Phần trăm ức chế enzyme (%)

Phụ lục 37: Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc của phần trăm ức chế enzyme tại các nồng
độ khác nhau của NA06

120
100

y = 0,2326x - 19,921
R² = 0,9724

80
60
40
20
0
0

100

200

300
400
NU07 (M)

500

600

Phụ lục 38: Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc của phần trăm ức chế enzyme tại các nồng
độ khác nhau của NU07

69

Phần trăm ức chế enzyme (%)

70
60

y = 0,1266x - 4,9821
R² = 0,9599

50
40
30
20
10
0

0

100

200

300
400
PT09 (M)

500

600

Phụ lục 39: Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc của phần trăm ức chế enzyme tại các nồng
độ khác nhau của PT09

70